膜式液基薄层细胞（TCT）制片的影响因素和对策

摘 要：目的：讨论江元JY-1200膜式液基薄层细胞（TCT）制片系统使用的影响因素和对策。方法：选取2017年7月1日至2017年10月31日我院门诊、住院和体检中心1047例TCT标本为研究对象，分为两组，第一组为7月1日至8月31日共505例标本，按厂家培训方法制片；第二组为9月1日至10月31日共542例标本，按改进后方法制片。所有液基制片均用巴氏染色、中性树脂胶封片后镜检。根据2001版TBS报告系统的要求，对两组TCT制片满意度进行评估。结果：发现第一组不满意制片49例（9.70%），第二组不满意制片13例（2.40%）。两组比较，改进后方法制片不满意率明显降低，两者差异有统计学意义（P<0.05）。结论：通过对制片方法的改进，能够有有效提高TCT制片的满意率。

关键词：TCT；TBS报告系统；不满意制片

液基薄层细胞制片技术是指薄层制片自动装置，制备细胞学标本（涂片或印片）的技术[1]，根据其制片原理分为膜式、离心式和自然沉降式。该方法制成的细胞膜片具有传统涂片无法比拟的优点[2]。作为宫颈疾病三阶梯式诊断程序中的第一步， 即细胞学筛查-阴道镜下活检-病理学检查[3]，在女性早期宫颈病变的发现和诊断中有非常重要的价值。我科自2017年7月引进广州江元公司的JY-1200膜式液基薄层细胞制片系统，经过一段时间的使用，发现不满意制片率较高。后经过探索和尝试，在原制片方法的基础上进行了改进，提高了制片满意率。现将制片方法进行介绍，并对两组标本的制片效果进行比较，重点探讨影响制片效果的因素和对策。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1一般资料研究对象为2017年7月1日至2017年10月31日我院门诊、住院和体检中心1047例妇科宫颈液基细胞标本，将其分为两组，第一组为7月1日至8月31日共505例，按厂家培训方法制片。第二组为9月1日至10月31日共542例，按改进后的方法制片。

1.1.2设备 JY-1200膜式液基薄层细胞制片机；F96-2型震荡仪；巴氏染缸；OLYMPUS CX-31型显微镜；江元TCT报告系统。

1.2方法

1.2.1第一组制片：1.标本用震荡仪震荡5分钟，将细胞打散形成悬液；2.吸取约1.2mL细胞悬液加入膜杯中，启动仪器制片；3.制好的细胞薄片用95%酒精固定15分钟，巴氏染色、中性树脂胶封片。

1.2.2第二组制片：1.标本用震荡仪震荡5分钟，将细胞打散形成悬液；2.评估标本的细胞量和性状，细胞量合适的标本外观为白色微浑浊。外观清澈透明的标本细胞数量较少，明显浑浊的标本则细胞数量过多，红色浑浊为血性标本，后三种情况的标本可能会对制片造成影响，将其挑选出来进一步处理。3.外观清澈透明的标本倒入5ml悬液至朔料离心管，水平式离心机1000转/分钟离心10分钟，弃去大部分上清液，留取1.2ml上清液和离心管底部沉淀，混匀；外观白色明显浑浊的标本用备用的细胞保存液稀释成微浑浊悬液；血性标本加入10%冰醋酸1滴混匀破坏血细胞后观察浊度，再按前述方法选择是否离心或稀释制片。4.吸取约1.2ml处理后的细胞悬液加入膜杯中，启动仪器制片。5.制好的细胞薄片用95%酒精固定15分钟，巴氏染色、中性树脂胶封片。

1.2.3制片效果评估：所有染好的细胞薄片用OLYMPUS CX-31型显微镜观察，根据2001版TBS报告系统的要求[4]，对两组TCT标本制片满意度进行评估，分为满意和不满意。

2.结果

发现第一组505例标本中出现不满意制片49例，发生率为9.70%。其中鳞状上皮细胞量不足为31例，占6.13 %；排除子宫切除患者标本，未见移行区细胞（包括宫颈管上皮细胞、化生细胞、储备细胞）5例，占0.99 %；血细胞严重遮挡上皮细胞，无法观察9例，占1.78%；制片过厚，细胞重叠造成阅片困难4例，占0.80%。第二组542例标本中出现不满意制片为13例，发生率为2.40%，其中鳞状上皮细胞数量不足为9例，占1.66%；未见移行区成分4例，占0.74%，无血细胞遮挡上皮细胞、制片过厚标本。从表可以看出，第二组制片不满意率低于第一组，数据采用SPSS23.0软件进行统计学处理，两组制片不满意率的比较采用？2检验，P<0.05，差异有统计学意义。

3.讨论

近年液基制片技术的出现大大提高了宫颈癌及癌前病变的检出率[5]，但TCT 的假阴性，假阳性诊断仍客观存在[6]，能否制出合格满意的液基薄片是准确诊断的关键所在。妇科取材是非常重要的一步，良好的取材能提高制片的满意率和诊断的准确性，但在实际工作中取材因素不是实验室人员能有效控制的。一方面可以通过加强与临床医师的沟通，使其意识到规范取材的重要性，提高取材质量。从另一方面，实验室人员也可通对制片流程的改进来提高制片的满意率。我科在原厂家方法的基础上，增加了对标本的评估和特殊标本的处理这两步，先通过初步观标本察浊度和颜色，挑出细胞过少、过多和血性标本。再对细胞过少的标本采用离心沉淀的方式富集细胞，细胞过多的标本用保存液稀释到合适浊度；血性标本用冰醋酸破坏红细胞后再处理。改进后的方法能够有效减少或消除因取材不佳造成的影响，提高TCT制片的满意率，为诊断的准确性提供可靠的保障。

参考文献：

[1]马博文.液基薄层细胞制片技术与宫颈细胞学诊断 [J].诊断病理学杂志， 2006，13（1）：1-7.

[2]張金库，张浙岩.子宫颈液基细胞学诊断图谱[M] .北京：人民军医出版2006：9.

[3]宋学红.子宫颈病变诊治技术的进展[J]现代妇产科进展， 2003，12 （1）：1.

[4] Solomon D. The Bethesda System for Reporting Thyroid Cytopathology Definitions， Criteria and Explanatory Notes[M] . Springer 2004：11-17.

[5]吴坤河，赖日权，张佳立，等.宫颈癌液基细胞学筛查与组织学检查的对比[J].实用癌症杂志，2005，20（1）：99.

[6]邓晓红，石新兰，李振强，等. TCT 制片质量控制分析[J]. 世界最新医学信息文摘2016，16（2）：192-193.