诃子等中草药源农药对常见植物病原菌的抗菌活性研究

摘要 用14种中草药提取物对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌进行了敏感性试验。其中诃子水提物对3种菌均有明显抑制作用，因此对诃子的抑菌作用作了进一步研究。采用不同浓度的诃子水提物对农作物病原菌的抑菌作用进行研究，结果表明：诃子水提物对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有明显抑制作用，抑菌谱广，且这种抑制作用与药物浓度呈正相关。

关键词 中草药源农药；诃子水提物；病原菌；抑菌作用

中图分类号 S482.2+92 文献标识码A文章编号1007-5739（2008）19-0149-02

由于化学农药在诸多方面产生了问题，造成的压力促使研究者投入大量人力、物力研究新一代的农药。植物源农药的研究和开发是解决当前化学农药诸多负面效应的一个重要研究方向[1]，其优势在于对环境安全、低毒、高效、无抗药性，以期用植物源农药替代或部分替代化学农药，已成为近年研究的热点[2-4]。本文对诃子等14种中草药的抑菌作用作了较为详细地研究，现将研究结果报道如下。

1材料与方法

1.1试验材料

1.1.1中草药。供试中草药为诃子、苦参、穿心莲、使君子、牡丹皮、蛇床子、青蒿、白前、半边莲、苍耳子、海桐皮、麻黄根、猫爪草、地黄等，中草药饮片均购于大连中医院。

1.1.2供试菌。供试菌为大肠埃希氏菌（Escherichia coli）、绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginos）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、白菜软腐病菌（Erwiniacarotowora）、黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum）、苹果圆斑病菌（Phyllosticta solitaria）、番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）、水稻恶苗病菌（Fusarium moniliforme），以上菌株由辽宁师范大学生命科学学院提供。

1.1.3培养基。供试培养基为PDA培养基和牛肉膏蛋白胨培养基。

1.2试验方法

1.2.1中草药水提物的制备。将14种中草药饮片各100g过植物粉碎机（100目）粉碎，用10倍量蒸馏水冷浸24h；然后按中药熬制方法进行熬制，过400目筛，收集过滤液，重复3次，合并提取液减压浓缩成浸膏状，稀释为10g/L备用，用时经滤膜除菌。

1.2.2菌悬液的配置。将供试菌种移接入相应试管斜面培养基上，置36～37℃恒温培养箱培养18～20h，挑取少许菌体于装有无菌生理盐水的试管内，震荡均匀，制成菌悬液。调整菌悬液浓度，用平板菌落计数法测定菌液浓度，并用稀释法将菌液稀释，使其浓度为1.0×106cfu/mL，即为供试菌悬液。

1.2.3抑菌作用的测定方法。牛津杯法：试验过程重复3次，计算平均值，用抑菌圈半径表示抑菌活性。

2结果与分析

2.1中草药对常见菌的抑菌作用

采用牛津杯法对各中草药水提物的抑菌活性进行了分析（见表1），试验结果表明：诃子、苦参、穿心莲、使君子、牡丹皮都具有较强的抑菌活性，其他的则相对较弱。并确定了部分中草药水提物的最低抑菌浓度（MIC）（MIC指药物完全抑制某种微生物生长的最低浓度）。其中诃子和苦参的MIC为0.625g/mL。诃子水提物对3种细菌均有很好的抑制效果，从抑菌效果和广度上都为最佳。

2.2不同浓度的诃子水提物对农作物病原菌的抑菌作用

为了进一步研究诃子的抑菌作用，选取5种常见的农作物病原菌进行试验，结果如表2所示。诃子的水提物对5种农作物病原菌都有很好的抑菌效果，最低抑菌浓度（MIC）为0.625g/mL。从图1中能明显看出，不同浓度的诃子水提物对病原菌均有很好的抑制效果，且这种抑制作用与药物浓度呈正相关。

3结论与讨论

诃子无论在强度还是在广度方面，都有很大的优势。另外，诃子不仅对常见菌有较好的抑制作用，对农作物病原菌同样有较强的抑制效果。且作为一种中药，具有毒性小、无传染、无残留、无耐药性的优点。

利用植物提取物抑制植物病原菌已有许多报道[5]，本实验室也已筛选出对植物病原真菌具有显著抑制作用的一些植物提取物，但这些研究还仅局限于实验室阶段，在生产中直接应用还有一定距离。如果将多种植物提取物构成复合制剂，发挥多种成分之间的协同或增效作用，可能会取得更好的效果[6]。笔者所在实验室在本研究的基础上，采用复方制剂抑菌的方法，正在对各种中草药水提物做进一步研究。

4参考文献

[1] 王大鹏，王进忠，孙淑玲，等.植物源农用杀菌活性物质研究与应用前景[J].北京农学院学报，2001，16（3）：75-79.

[2] 何昆，罗宽.中草药萃取液对植物病原真菌、细菌的抑制作用[J].湖南农业科学，2003(1)：43-44,45.

[3]LIUCHANG，ZOUWOUGXIN，TANRENXIANG.Antifungal activity of artenmisia annua endophyte cut taves against phy2topathogenic fungai[J].Journal ofBio technnology，2001，88（3）：277-282.

[4] 吴新安，花日茂.植物源抗菌、杀菌活性物质研究进展[J].安徽农业大学学报，2002，29（3）：245.

[5] 王树桐，曹克强，张凤巧，等.中药丁香提取物对番茄灰霉病菌抑制作用及生防效果[J].植物病理学报，2005，35（6）：91-94.

[6] 严梅桢，高晓山，刘林祥，等.黄连与黄芩、甘草配伍前后对金黄色葡萄球菌生长抑制作用的观察[J].中国中药杂志，1998，23（6）：55-57， 65.